產品簡介

ATP含量測試盒微量法公司正在出售的產品：肝胰腺細小病毒（HPV）核檢測試劑盒C型產氣莢膜桿菌(CP-C)核檢測試劑盒河弧菌(VF)核檢測試劑盒致病性大腸桿菌(EPEC)核檢測試劑盒沙門氏菌(SPP)核檢測試劑盒沙門氏菌SPP-sdfi核檢測試劑盒沙門氏菌SPP-spy核檢測試劑盒鼠疫桿菌(YP)核檢測試劑盒志賀氏菌(SH)核檢測試劑盒霍亂弧菌O1(VC O1)核檢測試劑盒霍亂弧菌O139(VC

商品屬性：

測定意義：

ATP 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定 ATP 含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態。

測定原理：

肌酸激酶催化肌酸和 ATP 反應生成磷酸肌酸，可在 700nm 下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量，以此反應 ATP 含量。

自備儀器和用品：

酶標儀、水浴鍋、可調式移液槍、96 孔板、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 2.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存；

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 1.2mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑四：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑五：液體 25mL×1 瓶，4℃保存；

標準液：液體 10mL×1 瓶，0.5μmol/mLATP 標準液，4℃保存；

組織樣本的前處理：

1、組織中 ATP 的提取：稱取約 0.1g 樣本，加入 1mL 蒸餾水，冰浴勻漿，100℃加熱提取 5min， 8000g 4℃ 離心 15min，取上清液待測。

2、細胞或細菌中 ATP 的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數 量（10 4個）：蒸餾水（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 蒸餾 水），超聲波破碎 1min（冰浴，強度 20％或 200W，超聲 2s，停 1s），8000g 4 ℃離心 15min； 取上清液待測。

3、血清（漿）中 ATP 的提取：取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 蒸餾水，冰浴勻漿，100℃ 加熱提取 5min，8000g 4℃ 離心 15min，取上清液待測。

測定步驟：

1、酶標儀或分光光度計預熱 30 min 以上，調節波長到 700nm，蒸餾水調零。

2、顯色劑的配制：臨用前請根據擬用顯色劑體積（樣本數×0.2 m L），按試劑四(mL)：試劑五（mL）=1：5 的比例配制。用多少配多少。

3、樣本測定：

試劑名稱(μL) 測定管 標準管 空白管

樣本 10

標準液 10 10

試劑一 20 20

試劑二 10 10 10

試劑三 10 10

蒸餾水 30

充分混勻，37℃準確水浴 30min

顯色劑 200 200 200

37℃水浴 20min 后，700nm 下測定各管吸光值

注意：空白管和標準管通常只需要各做一個。

ATP 含量計算：

1、血清（漿）中 ATP 含量計算

ATP 含 量 (μmol/mL)=[C 標 準 管 ×(A 測 定 管 － A 空 白 管 )÷(A 標 準 管 － A 空 白 管 ) ×V1]÷(V3×V1÷V2)=5×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)

2、組織、細菌或細胞中 ATP 含量計算

（1）按蛋白濃度計算

ATP 含 量 (μmol/mg prot)=[C 標 準管 ×(A 測 定管 －A 空 白管 )÷(A 標 準管 －A 空 白管 ) ×V1]÷(V1÷Cpr）=0.5×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷Cpr蛋白質含量需要另外測定。 （2）按樣本鮮重計算

ATP 含 量(μmol/g 鮮 重)=[C 標 準 管 ×(A 測 定 管 －A 空 白 管)÷(A 標 準 管 － A 空 白 管) ×V1]÷(W×V1÷V2)=0.5×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W

（3）按細菌或細胞密度計算

ATP 含量(μmol/10

4 cell）=[C 標準管×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管) ×V1]÷(500×V1÷V2)=0.001×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)C 標準管：標準液濃度，0.5μmol/mL；V1：加入反應體系中樣本體積，0.01mL；V2：加入提取液體積，1mL；V3：加入血清（漿）體積：0.1mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL； W：樣本質量，g；500：細胞或細菌總數，500 萬。

注意：低檢測限為 10nmol/mL 或 10nmol/g 鮮重或 0.1nmol/mgprot

生化檢測試劑盒實驗操作說明：

一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性（GOD）檢測、總抗氧化能力（TAC）檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚（TP）含量檢測試劑盒。

氧化酶（XO）活性分析試劑盒為例，提供了一種簡單易用的比色分析法，用于測定各種樣品中的XO活性，特點是測定血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性，以及廣泛的檢測范圍：15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫（H2O2）檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

蛋白質羰基含量檢測試劑盒（比色法）為例，提供了一種簡單易用的比色法，用于分析不同生物樣品（細胞/組織裂解液，生物液體）中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

特點是：1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。

三、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例，提供一種簡單易用的比色測定法，用于定量測定血清，血漿，組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點是：1.測定血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性，zui大抑制率可接近100％，不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍：3.13- 200U/mL。

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