產品簡介

αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)測試盒微量法的相關產品：海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒可見分光光度法海藻糖含量測試盒微量法海藻糖含量測試盒可見分光光度法海藻糖合成酶(TS)測試盒微量法海藻糖合成酶(TS)測試盒可見分光光度法海藻糖酶測試盒微量法

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

商品屬性：

測定意義：

α-L-Af 是一種能夠水解非還原呋喃阿拉伯糖殘基的糖苷酶類，使細胞壁阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯甘露聚糖等中性糖不斷解離，促進果膠的增溶和降解。由于果實成熟過程中常常伴隨著阿拉伯糖的喪失，該酶活性在果實成熟軟化中的研究具有重大意義。
測定原理：
α-L-Af分解對硝基酚阿拉伯呋喃糖苷生成對-硝基苯，后者在400nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算α-L-Af活性。
自備用品：
酶標儀/可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前加入 2.5mL 蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑

仍-20℃保存。

試劑二：液體 4mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 13mL×1 瓶，4℃保存。

組織樣本的前處理：

1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量

（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟：

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 400nm，蒸餾水調零。

2、樣本測定（在 EP 管或 96 孔板中依次加入下列試劑）：

試劑名稱（μL） 測定管 對照管

試劑一 25

蒸餾水 25

試劑二 35 35

樣本 10 10

迅速混勻，放入 37℃保溫 30min

試劑三 130 130

充分混勻， 400nm 處測定吸光值 A，計算 ΔA=A 測定-A 對照。每個測定管需設一個對照管。

α-L-Af 活性計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為 y =0.00585x -0.0027；x 為標準品濃度（nmol/mL），y 為吸光值。

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白每 min 產生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T

=39.89×(ΔA+0.0027) ÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織每小時產生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/g 鮮重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T

=39.89×(ΔA+0.0027) ÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每小時產生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.00585×V 反總]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T=0.08×(ΔA +0.0027)

Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；V 反總：反應體系總體積，0.07mL；V 樣：加入反應體系

中樣本體積，0.01mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質量，g； 500：細胞或

細菌總數，500 萬；T：反應時間，30min。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為 y = 0.0039x -0.0027；x 為標準品濃度（nmol/mL），y 為吸光值。

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白每小時產生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T

=59.83×(ΔA+0.0027) ÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織每小時產生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/g 鮮重)=[(ΔA+0.0027)÷0.0039×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T

=59.83×(ΔA+0.0027) ÷W

（3）按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每小時產生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V 反總]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T

=0.12×(ΔA +0.0027)

Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；V 反總：反應體系總體積，0.07mL；V 樣：加入反應體系

中樣本體積，0.01mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質量，g； 500：細胞或

細菌總數，500 萬；T：反應時間，30min。

生化檢測試劑盒實驗操作說明：

一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性（GOD）檢測、總抗氧化能力（TAC）檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚（TP）含量檢測試劑盒。

氧化酶（XO）活性分析試劑盒為例，提供了一種簡單易用的比色分析法，用于測定各種樣品中的XO活性，特點是測定血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性，以及廣泛的檢測范圍：15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫（H2O2）檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

蛋白質羰基含量檢測試劑盒（比色法）為例，提供了一種簡單易用的比色法，用于分析不同生物樣品（細胞/組織裂解液，生物液體）中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

特點是：1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。

三、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例，提供一種簡單易用的比色測定法，用于定量測定血清，血漿，組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點是：1.測定血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性，zui大抑制率可接近100％，不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍：3.13- 200U/mL。

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