產(chǎn)品簡介

梅毒螺旋體梅毒亞種PCR檢測試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

梅毒螺旋體梅毒亞種PCR檢測試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
梅毒螺旋體梅毒亞種PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

B16-F1(小鼠黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元gersion

P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2

HuH-7(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

C4-2(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2

EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復(fù)液, 50x)100ml國產(chǎn)

小鼠腮腺細胞*培養(yǎng)基100mL

AR42J(大鼠胰腺外分泌細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠白血病細胞英文名稱：M1

199培養(yǎng)基/M199培養(yǎng)基/M199 Medium細胞培養(yǎng)用500ml/10升國產(chǎn)/進口

人食管細胞英文名稱：KYSE30

梅毒螺旋體梅毒亞種PCR檢測試劑盒品牌phospho-p23 (Ser113)  磷酸化端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體 0.1ml

PHYH  植烷酸氧化酶抗體 0.2ml

Mre11/HNGS1  DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體 0.2ml

HSP90 β  熱休克蛋白90β 抗體 0.2ml

phospho-B-Raf (Thr597)  磷酸化B-Raf抗體 0.1ml

TSPY1  特異定蛋白質(zhì)編碼Y1抗體 0.1ml

C17orf104  17號染色體開放閱讀框104抗體 0.2ml

TGF beta 3  轉(zhuǎn)移生長因子β3（TGFβ3）抗體 0.1ml

ASB12  含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體 0.2ml

EBNA 3A  EB病毒核抗原-3A抗體 0.2ml

MATH1  腸道分化干細胞MATH-1蛋白抗體 0.1ml

HNF4/TCF4/HNF4A  肝細胞核因子4α抗體 0.1ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。