產(chǎn)品簡(jiǎn)介

中華根瘤菌通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

中華根瘤菌通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
中華根瘤菌通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書                                   1份

改良Giolitti-Cantobi肉湯/Modified Giolitti-Cantobi Broth用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

黑大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱：NRL1

WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

293A，人胚腎上細(xì)胞系（腺病毒包裝級(jí)別）

大鼠晶狀體上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

肝浸粉（牛）/牛肝浸粉/肝消物/Liver extract powder(Beef)BR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

肺英文名稱：Lewis瘤

明膠發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠肝星形細(xì)胞英文名稱：HSC-T6

無(wú)菌小鼠血清/Sterile Defidrinated Mouse BloodBR100/500毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中華根瘤菌通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢phospho-PRKCZ(Thr500)  磷酸化蛋白激酶C(T500)抗體 0.2ml

p53 (FL-393)  腫瘤抑制基因p53抗體 0.2ml

PCDHA12  原鈣粘蛋白12抗體 0.2ml

KBTBD10  BTB-kelch蛋白家族10抗體 0.2ml

CDKN2B/p15 INK4b  細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體 0.2ml

ERR-alpha  雌激素受體相關(guān)蛋白α抗體 0.2ml

phospho-ATG9A(Ser735)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 0.1ml

Phospho-MKK4(Ser80)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 0.1ml

CD11b/Integrin αM/Integrin Alpha M  整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 0.1ml

HAI-1  肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體 0.1ml

GCOM1  GCOM1蛋白抗體 0.2ml

phospho-Smad3(Ser213)  磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。