產(chǎn)品簡(jiǎn)介

里氏立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

里氏立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品：
里氏立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書                                   1份

CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Flag標(biāo)簽蛋白裂解液20 ug20μg、100μg

小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

BC-020(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腸微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

L-Glutamine (100X)規(guī)格：100ml

人胎盤羊膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

MCPC培養(yǎng)基/MCPC Medium弧菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人卵巢細(xì)胞英文名稱：COC1

醋酸鹽瓊脂/乙酸鹽瓊脂/Acetate Agar細(xì)菌醋酸鹽試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

牛腎細(xì)胞英文名稱：MDBK (NBL-1)

里氏立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒品牌鹽酸帕羅西汀 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定（HPLC）

檳榔 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

西貝母堿 英文名稱 西貝素；西貝堿  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Sipeimine

鹽酸多奈齊 英文名稱 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：

船形烏頭 英文名稱 TLC法鑒別  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：

8-O-乙酰山梔苷甲酯 英文名稱 8-O-acetylshanzhiside methyl ester  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 97%

野黃芩苷（燈盞花乙素） 英文名稱 Scutellarin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%

川西獐牙菜 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

醋酸鈉 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC法含量測(cè)定

紅景天苷 英文名稱 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：

毒靈  英文名稱 Bufalin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： ≥98%

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。