產(chǎn)品簡介

HL-1 (小鼠心肌細(xì)胞)的相關(guān)*：M. gastri RFLP基因分析試劑盒 20次
通用型基因甲基化程度定量分析試劑盒 20次
CACNA1G基因甲基化程度定量分析試劑盒 20次
CDKN2A基因甲基化程度定量分析試劑盒 20次
CRASP基因甲基化程度定量分析試劑盒 20次
MLH1基因甲基化程度定量分析試劑盒 20次

產(chǎn)品屬性： 

商品介紹：

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

實驗要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 DMKN 基因全長ORF克隆

 MIA 基因全長ORF克隆

 SUMO2 基因全長ORF克隆

 DBH 基因全長ORF克隆

 ALDH1B1 基因全長ORF克隆

 CDK5RAP1 基因全長ORF克隆

 CYP20A1 基因全長ORF克隆

 SEZ6 基因全長ORF克隆

 IGSF8 基因全長ORF克隆

 ITGA1 基因全長ORF克隆

HL-1 (小鼠心肌細(xì)胞)TSN瓊脂 英文名稱：TSN Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pro-MCH

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Lysophosphatidic acid receptor 4

葡萄糖 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支

78-5000 pg/mL 西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Phosphoglycerate kinase 1

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Ovostatin homolog 2

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 4

1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Prostaglandin G/H synthase 2

布魯氏菌培養(yǎng)基 英文名稱：Brucella Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g