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      產品中心

      當前位置:首頁產品中心科研細胞細胞系HPAF-II (胰腺癌細胞)
      HPAF-II (胰腺癌細胞)

      產品簡介

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      組蛋白H4-K20(mono/di/tri)甲基化檢

      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-18
      廠商性質:經銷商
      訪問量:401
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X0597
      規格1×10?cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      產品屬性: 

      產品名稱

      規格

      貨號

      HPAF-II (胰腺癌細胞)

      1×10?cells/T25培養瓶

      GOY-01X0597

      商品介紹:

      名稱    HPAF-II (胰腺癌細胞)  

      別稱HPAF II; HPAFII; HPAF-2; HPAF2; HPAF/CD18; CD18/HPAF; HPAF-II/CD18; CD-18; CD18; CD 18

      種屬人類

      年齡(性別)男性,44

      組織來源胰腺癌

      生長特性貼壁細胞

      細胞形態上皮細胞樣

      背景描述HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from peritoneal ascitic fluid of a 44 year old Caucasian male with primary pancreatic adenocarcinoma and metastases to the liver, diaphragm and lymph nodes.-

      生物安全等級1

      生長培養基MEMATCC改良)10% FBS1% P/S

      推薦傳代比例1:2-1:3

      推薦換液頻率2~3/

      倍增時間~26小時 (PubMed=2734279); 70小時 (PubMed=25984343)

      凍存條件

      凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

      溫度:液氮

      培養條件

      氣相:空氣,95%;CO2,5%

      溫度:37℃

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

      QQ截圖20210907103850.png

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       DMKN 基因全長ORF克隆

       MIA 基因全長ORF克隆

       SUMO2 基因全長ORF克隆

       DBH 基因全長ORF克隆

       ALDH1B1 基因全長ORF克隆

       CDK5RAP1 基因全長ORF克隆

       CYP20A1 基因全長ORF克隆

       SEZ6 基因全長ORF克隆

       IGSF8 基因全長ORF克隆

       ITGA1 基因全長ORF克隆

      HPAF-II (胰腺癌細胞) 1%葡萄糖肉湯培養基 英文名稱:1% Dextrose Broth Medium 產品規格:250g

      0.78-50 ng/mL 人NADPH氧化1(NOX-1)ELISA試劑盒

      0.312-20 ng/mL 人線粒體轉氨(OAT)ELISA試劑盒

      0.78-50 ng/mL 人C9orf140蛋白(Protein C9orf140)ELISA試劑盒

      3.12-200 ng/mL 人纖溶抑制因子(TAFI)ELISA試劑盒

      厭氧菌瓊脂 英文名稱:Anaerobic Agar 產品規格:250g

      大腸桿菌成套生化鑒定管 英文名稱: 產品規格:4種*4套

      0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Advanced glycosylation end product-specific receptor

      0.156-10 ng/mL 豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

      15.6-1000 umol/L 甲型副傷寒沙門氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

       


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